《大蛇再襲》主要講述了男主角任杰（賴藝飾）為了籌集身患絕癥兒子的醫療費用，報名參加荒島闖關贏取百萬獎金的真人游戲。在神秘島嶼上，他與神秘美女白領娜迦（辛玨飾）、過氣主播褚甜甜（黎云飾）、便利店店員梁海、中年婦女張素英、醫藥公司老板張子峰（袁珉飾）、救護車司機方文建（王議偉飾）以及愛占小便宜的無業青年呂峰（佳欣飾）組成闖關隊伍。隨著游戲推進，原本以競技奪金為目標的挑戰逐漸演變為生死考驗：巨額獎金引發隊友間信任崩塌，群體性內訌頻發；與此同時，荒島中潛伏的巨型蟒蛇突然現身追殺眾人，導致隊員接連傷亡。在闖關任務與逃生求生的雙重壓力下，這群看似無關聯的參與者逐漸暴露出復雜的人際糾葛與隱藏動機。面對致命機關、巨蟒威脅以及人性考驗，幸存者必須破解游戲背后的終極真相才能逃離險境。