二戰期間，希特勒召集考古學家尋找《圣經》中記載的圣物"失落的約柜"，意圖借助其超自然力量保障納粹戰爭勝利?？脊艑W教授印第安納·瓊斯（哈里森·福特飾）受命阻止計劃，先是在尼泊爾寺廟中與納粹特工展開搏斗并獲取關鍵線索，隨后輾轉埃及沙漠破解古代地圖。他成功找到指示約柜位置的太陽手杖并發現埋藏圣物的法老墓穴，但納粹少校埃內斯特點（保羅·弗里曼飾）突襲奪走約柜，并將瓊斯與盟友囚禁于遍布毒蛇的密室。瓊斯憑借智慧逃脫后，聯合舊情人瑪麗昂（凱倫·阿蘭飾）追蹤納粹至開羅基地。在納粹舉行的啟棺儀式上，約柜中爆發的神罰之力瞬間消滅所有開啟者，瓊斯拼死保護瑪麗昂免遭波及。最終盟軍成功奪回約柜，將其封存于美軍運輸機的秘密貨箱中。